Part 3. Efectes dels camps electromagnètics de freqüència extremadament baixa sobre la inhibició de la cèl·lula tumoral i el possible mecanisme 
Discussió
L’exposició a Feld magnètica té el potencial de servir com a estratègia avançada en la gestió del càncer . ROS produïda
per cèl·lules que utilitzen aquest mètode semblen ser la clau per a la inhibició del creixement del tumor3. Hem demostrat que el mecanisme principal
No només estava relacionat amb ROS, sinó que també es relacionava estretament amb el contacte entre cel·les ., vam especular que el magnètic
L’exposició a Feld va canviar la secreció de certs substrats, donant lloc als canvis en la senyalització i així restaurar
Inhibició del contacte de les cèl·lules tumorals . basada en els resultats experimentals i els experiments anteriors, quatre propietats de
Es resumia la supressió de Feld Magnetic .
1.Els experiments sobre la inhibició del camp magnètic de les cèl·lules, especialment les cèl·lules Raji, van demostrar que el contacte proper
Entre les cèl·lules van determinar directament si existia l'efecte d'inhibició . com es mostra a les Figs . 2 a, 3a i c,
L’agregació suspesa va accelerar el creixement de les cèl·lules tumorals en suspensió, mentre que l’exposició al camp magnètic
va inhibir el creixement de cèl·lules tumorals . com es mostra a la Fig . 3 C, la taxa d'inhibició del camp magnètic va variar el dia 9
Depenent de la zona de la part inferior del contenidor . el nombre de cèl·lules exposades agrupades en una àrea de 55
CM2 va ser significativament superior a la en una superfície de 25 cm2, però no es va trobar cap diferència significativa entre
el nombre de cèl·lules exposades agrupades i les del grup de control no exposat . durant aquest període, el
La inhibició de les cèl·lules tumorals en suspensió va desaparèixer, cosa que indica que la distància entre els clústers cel·lulars es va expandir
i el creixement cel·lular va accelerar . al contrari, en el matràs de cultiu 25- cm2, la diferència en el nombre de
Les cèl·lules entre els grups exposats i els control van augmentar significativament, és a dir, la velocitat d'inhibició va augmentar .
Això va indicar que les cèl·lules tumorals van recuperar la inhibició del contacte sota exposició al camp magnètic . Per tant, el
La inhibició del camp magnètic va requerir un contacte proper entre cel·les .
2.L’experiment amb cèl·lules adherides va demostrar que les cèl·lules tumorals eren més susceptibles a l’inhibi magnètic
ció utilitzant medis condicionats més adequats per al creixement de les cèl·lules . com es mostra a la Fig . 1 B i C, el nombre de tumor
Les cèl·lules del medi condicionat del grup de control no exposat eren significativament superiors a les fresques
medi, mentre que el nombre de cèl·lules tumorals del medi condicionat del grup exposat va ser significativament
inferior al del medi fresc (l'efecte d'inhibició magnètica va ser significativament més elevat en el grup d'infusió
que en el grup de canvi) . es va suggerir que el medi condicionat era adequat no només per al
Creixement exponencial de cèl·lules en absència del camp magnètic, però també la comunicació entre cèl·lules,
que va augmentar l'efecte d'inhibició del contacte sota el camp magnètic . Per tant, la inhibició del camp magnètic
La velocitat depenia de l'estabilitat de l'entorn per ampliar la inhibició del contacte .
3. Vam determinar que certs substrats del medi condicionat també van contribuir a la inhibició magnètica .
Es va observar inhibició quan el medi condicionat per infusió (A549) es va transferir a no exposat
cèl·lules després de l'exposició al camp magnètic, demostrant la presència de senyals d'inhibició al medi . el
Les cèl·lules tumorals en suspensió eren menys sensibles a la inhibició magnètica en comparació amb les cèl·lules tumorals adherides .
A més, l'agregació cel·lular es va veure inevitablement afectada durant la transferència del medi condicionat . Per tant,
Es va requerir més disseny i consideració per a la transferència de medis condicionals de la suspensió de cèl·lules tumorals .
En un estudi de cèl·lules xenogèniques en què els medis condicionats de cèl·lules normals 293 T i les cèl·lules tumorals A549 eren
Es van intercanviar i transferir a cèl·lules no exposades després de l’exposició al camp magnètic, les cèl·lules tumorals van mostrar inhibició
mentre que les cèl·lules normals no mostraven una inhibició significativa . va indicar que alguns substrats interactuaven amb
El camp magnètic era omnipresent en cèl·lules sensibles a les cèl·lules tumorals . La figura 5c i D indica que aquests substrats
també existia a les cèl·lules no tumor
La capacitat d’inhibició de les cèl·lules no tumores no es va silenciar i, per tant
per aquestes substàncies . El nombre de cel·les de control sense transferència era superior al del grup de transferència, possiblement
Perquè el medi de la condició A549 no era adequat per al creixement de cèl·lules no tumor . basades en els resultats
d’inhibició magnètica reduïda després de la dispersió de les cèl·lules de suspensió o la separació del clúster, es va especular que el
Els substrats poden estar relacionats amb la comunicació intercel·lular i la inhibició del contacte cel·lular . El senyal intercel·lular
augmentat i la inhibició del contacte va desaparèixer quan es van suspendre les cèl·lules i es van separar o els grups també
A part separada . Per tant, les cèl·lules van segregar un o més substrats, i els camps magnètics de baixa freqüència van interactuar amb
Les cèl·lules i els substrats inhibeixen específicament les cèl·lules tumorals .
La relació entre substàncies rellevants, mitjans condicionats i necessitats d’inhibició del contacte
Verificació mental .
4. El nostre camp magnètic de baixa freqüència in vitro tenia un punt comú que la inhibició magnètica
L’eficiència va augmentar amb l’augment del temps d’exposició quan les cèl·lules es van agrupar i l’entorn de cultiu
era estable (medi condicionat per infusió), que era coherent amb la majoria dels informes actuals . mitjana
mentre que la majoria dels informes també van suggerir que la intensitat del camp magnètic es correlacionava positivament amb el magnètic
Eficiència . Per tant, l'eficiència de supressió magnètica es correlaciona positivament amb el temps d'exposició de MAG
intensitat de camp nètic2,3,19, 20.
Per a l'exposició al camp de baixa freqüència, la tinció blava de trypan no va revelar cap tinció òbvia de cèl·lules i cap significativa
Diferència en l’activitat cel·lular, que podria estar relacionada amb el fet que no es va observar la mort cel·lular a causa de la taca directa
després del tractament . va indicar que el camp magnètic no va matar directament les cèl·lules, però va induir contínuament
apoptosi; Per tant, les cèl·lules no es van tacar amb Trypan Blue . Altres informes van demostrar que la intracel·lular
L’activitat Caspase -3 es va regular i la integritat de la membrana va disminuir després de l’exposició al camp magnètic2, 3 .
Els informes van revelar que algunes cèl·lules tumorals tenien eficiència de tinció19, que podrien estar relacionades amb el tipus de cèl·lula i la detecció
La selecció de temps . Annexin V Tining també va mostrar una inhibició magnètica progressiva . No obstant això, l'efecte variava
per la cel·la Tipus 2 .
L’efecte específic dels camps magnètics sobre la senyalització a l’entorn cel·lular encara no és clar . La senyalització
La via implicada en el camp magnètic pot estar relacionada amb la inhibició del contacte i l'herència epigenètica .
per senyals cel·lulars1,22,27–29, presumim la presència de senyals elèctrics entre cèl·lules i ions de calci, que
són el segon missatger associat a la divisió cel·lular . Diversos experiments de sonda fluorescent van demostrar que el
El canvi en el potencial de membrana estava relacionat amb l'exposició al camp magnètic i el potencial de la membrana
La reacció va ser diferent entre les cèl·lules adherents i en suspensió . El potencial de membrana de les cèl·lules adherides tendia a
estar hiperpolaritzat sota el camp magnètic . El potencial de membrana de les cèl·lules tumorals en suspensió agrupades
per despolaritzar -se sota el camp magnètic ., això pot estar relacionat amb el creixement cel·lular i la intercel·lular associada
Resposta de comunicació sota el camp magnètic . com es mostra a la Fig . 3 C i E, en suspensió i cèl·lules Raji aïllades
Va créixer més ràpidament sota el camp magnètic . Les troballes de Yong Zhou Team27 van explicar aquest fenomen . la cel·la
La taxa de creixement va augmentar durant la despolarització, que va suposar la nanoagregació de k-ras commuta
Superfície de membrana . Les cèl·lules tumorals en suspensió es dispersen entre elles, la senyalització intercel·lular
Les substàncies van augmentar i la inhibició del contacte cel·lular induït per camp magnètic va desaparèixer . Mentrestant, la cèl·lula
Es va despolaritzar el potencial de membrana de les cèl·lules tumorals en suspensió, que van accelerar el creixement cel·lular i la inhibició
va disminuir o desaparèixer . El senyal de calci intracel·lular i el potencial de la membrana amb el canvi en el
El camp magnètic estava relativament sincronitzat (excepte A549) . Hipotetem que la concentració de ions de calci
es va associar amb el potencial de membrana en l'exposició al camp magnètic . A més, només es van mostrar 293 cèl·lules T
Diferències significatives en la concentració d’ions de calci quan s’exposa al camp magnètic .
relacionat amb la hipermetilació de la xarxa de senyalització de calci associada al tumor 30. actualment, la relació
entre la concentració d’ions de calci i el potencial de membrana i el senyal d’inhibició del camp magnètic no ho és
esborrar . A més, el pH intracel·lular de les cèl·lules A549 va augmentar sota el camp magnètic .
El fet que les cèl·lules A549 fossin més sensibles al camp magnètic . també, aquesta pot ser la raó per la qual el calci
El canvi en les cèl·lules A549 no es va sincronitzar amb el potencial de membrana .
Aquest estudi tenia certes limitacions . en els experiments sobre cèl·lules tumorals suspeses, hem utilitzat una pipeta per destruir
l'estructura del clúster i no podríem mantenir les cèl·lules separades tot el temps durant l'exposició al camp magnètic .
A més, no podríem mantenir l’agregació cel·lular durant la transferència a contenidors més grans cada 3 dies . en detectar
Ions i potencial de membrana, sabíem que el potencial de membrana estava relacionat amb l'exposició al camp magnètic .
Tanmateix, el kit només podria mesurar l’estat d’un determinat període i, per tant, la detecció en temps real sincrònic
necessaris per aclarir la relació específica . A més, els canvis en el potencial de la membrana també van indicar el
Canvis en els senyals intracel·lulars . Per tant, es va especular que es podria utilitzar el potencial de membrana com a
significa verificar l'efecte inhibidor del camp magnètic sobre les cèl·lules tumorals .
Combinant les quatre propietats clau esmentades de l'efecte inhibidor del camp magnètic sobre les cèl·lules
pot servir de bona modalitat anticancerigen adjuvant . Actualment, la teràpia de camp magnètic ha augmentat augmentant
Atenció . A més, la universalitat dels senyals cel·lulars amb l'exposició al camp magnètic i l'espectre ampli de
Els tumors la converteixen en una excel·lent metodologia per al tractament i el pronòstic . les nostres troballes, juntament amb altres informes,
A més, va revelar el potencial de la teràpia de camp magnètic . El nostre proper estudi se centrarà en els mecanismes implicats
En camps magnètics, començant pels substrats .
Mètodes
Test Kit .Es va comprar un kit de sonda de calci calbryte 520 am (element no . 20650) a AatBioQuest (EUA) .
El buffer de Hanks amb 20 mm Hepes (element no . 20011) i la sonda fluorescent potencial de la membrana DibAC4 (3)
(Element no . 21411) també es van comprar a AatBioQuest . una sonda fluorescent d'ions de sodi sbfi (element no . 18764)
es va comprar a Cayman Company (EUA) . una sonda fluorescent de potassiu
Comprat a la Cayman Company . Pluronic F -127 (St 501-10 G) es va comprar a Beyotime Biotechnol
ogy .
Cultura de la cel·la .293 cèl·lules T, cèl·lules HepG2 i cèl·lules A549 es van obtenir del banc cel·lular de l’acadia xinesa
Emy of Sciences (Xangai, Xina) . Les línies cel·lulars es van cultivar a DMEM (Indústries biològiques, Israel) amb
10% sèrum boví fetal (FBS, excel·lent bio, Xina) i 1% de penicil·lina - Estreptomicina (P/S, Industries, Israel) .
Les cèl·lules es van incubar a 37 graus en presència de 5% CO 2. Totes les operacions es van realitzar dins del flux vertical
Netegeu el banc .
Les cèl·lules Raji es van cultivar al medi RPMI1640 (indústries biològiques) amb un 10% de FBS i 1% P/S .
Les cèl·lules es van incubar a 37 graus en presència de 5% CO 2. Totes les operacions es van realitzar dins del flux vertical
Netegeu el banc .
Exposició i característiques de camp magnètic .El generador de camp magnètic fabricat per si mateix va convertir elec
Els senyals tricals en senyals de camp magnètic a través d’un fil de coure esmaltat (fig . 6, fig . s4) . es va fer la closca
de material plàstic estirene de butadiene acrilonitril amb especificacions: 450 × 230 × 25 (L × d × h, mm3) . el mag
La sortida del camp nètic es podria canviar ajustant la freqüència i l'amplitud de la tensió d'alimentació de l'alimentació de
L'equip al camp magnètic: el dispositiu que genera . El dispositiu generador de camp magnètic es va col·locar en un
La incubadora i el camp magnètic es va mesurar amb un mesurador Gauss (TES 1393; TES Electrical Electronic Corp,
Taiwan) . Les cèl·lules del grup no exposat es van col·locar a la mateixa incubadora (Thermo Scientific, EUA) .
La direcció del camp magnètic era perpendicular al generador de camp magnètic . durant tot l'experiment,
La intensitat del camp magnètic perdut a cada incubadora era inferior a 0. 02 MT (0–0,02 mt) i la temperatura
Ture es va ajustar a 37 ± 0 . 18 graus.
Compta de cel·la .Cèl·lules adherides: el sobrenedant es va recollir en un tub de centrífuga i es va rentar dues vegades
Salina normal . Es va extreure el sobrenadant netejat, es va afegir al tub de centrífuga i després es va digerir amb
Figura 6.Sistema d’exposició de camp magnètic . (a) Diagrama esquemàtic del sistema d’exposició de camp magnètic .
es descriuen a la secció Mètodes . (b) Forma de camp magnètic .
Continuarem actualitzant el contingut del treball, així que estigueu atents a la nostra secció de coneixement de la indústria.